一级菌种的培养方法和注意事项

（1）培养环境条件

经接种后的母种需要放在适宜的环境条件下进行培养。培养条件包括温度、湿度、空气和光照。不同种类的食用菌对环境条件的要求有所不同，所以要根据它们的生理要求进行培养。

①温度　温度是影响食用菌生长发育的重要环境因素，控制适宜的温度是菌种培养中最重要的环节。温度直接关系到菌丝体生长的快慢及菌丝体的健壮程度。在菌种生产过程中，培养的温度过高菌丝生长太快易造成菌种早衰，太低则菌丝生长缓慢，生产周期延长。培养时有条件的最好装有控温设施，如条件不允许，只能利用自然温度进行食用菌生产，这就要求根据栽培品种合理安排播种期。除草菇外多数食用菌菌丝体适宜生长温度为20～25℃，但是由于菌丝体在生长发育过程中进行呼吸作用产生热量，致使培养料温要比培养室温高1～4℃，因此培养室的温度应控制在比该菌种最适温度低2～3℃。

②湿度　虽然菌种在相对密封的容器中生长，但过低的湿度不利于培养料含水率的保持，过高的湿度容易引发杂菌从袋头或瓶口处污染。在自然条件下培养，对湿度一般不需多加管理，但是遇上梅雨季节或多雨天气一定要注意加强通风保持培养室的干燥。食用菌在菌丝体生长阶段对空气相对湿度的要求一般在60%～70%。如果在加温条件下培养，室内的相对湿度应保持在65%左右，可以使用空气加湿器或培养室地面洒水等方法来提高湿度。

③空气　食用菌基本上都属于好气性真菌，通气的好坏直接影响着菌丝的生长健壮程度，菌种培养室要设置良好的通风系统，在菌丝培养阶段一定要注意培养室的通风换气，一般每天进行通风1～2次，每次20～30min。

④光照　食用菌在菌丝生长阶段一般不需要光线或只需微弱的散射光，在黑暗处长得快、齐、壮，光线对菌丝体发育有明显的抑制作用，因此培养室要求要阴暗、避光，特殊情况下要进行遮光处理。

（2）培养期间的杂菌检查

在母种的培养过程中一定要及时地、经常地检查所培养的菌种是否感染了杂菌，如有感染要及时剔除、清理。培养期间主要检查两方面：一是有无感染杂菌，二是菌丝生长是否正常，包括形态、长速、活力、均匀度等。根据以下原因探讨并介绍鉴别方法。

①母种感染杂菌的原因

第一，用于扩大繁殖的菌种本身感染，菌种接入新的培养基后将杂菌带入。

第二，接种、分离操作没有按照无菌操作规程进行。

第三，培养基灭菌不彻底。

第四，制备培养基时，培养基沾到棉塞上，棉塞有杂菌带入。

第五，培养基灭菌时棉塞受潮，又遇高温高湿天气，空气中的杂菌孢子落到棉塞上萌发菌丝进入。

第六，菌种保藏期间湿度较大，使棉塞感染杂菌带入。

②母种感染杂菌的鉴别方法

食用菌的菌丝体多为白色丝状体，生长均匀，一般不产生有色孢子，在25℃条件下培养10～15d能长满试管斜面。在母种培养基中的杂菌主要是细菌、酵母菌及各种霉菌，细菌在PDA培养基上表现为黏糊的圆形小颗粒状；酵母菌则表现为成片的或小圆形颗粒，湿润半透明，呈红色、黄色等；霉菌感染开始为白色、灰色菌丝，很快产生绿色、黑色、橘黄色、草绿色等不同颜色的粉末状孢子。无论是哪一类杂菌感染，它们的生长速度都很快，在25℃条件下只需3～5d就能长满培养基斜面。所以检查杂菌这项工作一般从接种后3～4d开始，每天隔天进行一次，直到菌丝封面。