一级菌种培养基制备的原理 配方组成

食用菌一级培养基主要用于菌种的提纯、扩大、转管、分离及菌种保藏，一般用试管作为容器，又称为试管斜面培养基或母种培养基。

在菌种制备过程中，从母种到原种、栽培种，各个阶段的目的要求有所不同，所选用的培养基的配比也应有所区别。一般母种菌丝较嫩弱，分解养分能力差，要求营养丰富、完全，氮源、维生素的比例应高。须选用易于被菌丝吸收利用的物质，如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类等。

培养基制备的基本程序：配料→溶化→测定及矫正pH→过滤→分装→灭菌→无菌检查。

1.基本要求

（1）营养成分　要想培养出优良的一级菌种，必须提供优良的培养条件，首先是营养条件。一级菌种培养基必须营养全面且易于吸收。

（2）容器　一级菌种培养基通常用玻璃试管做容器，按不同的配方加上琼脂凝固剂，制成琼脂斜面培养基，又叫斜面培养基，简称斜面。斜面培养基平整光滑，一级菌种在斜面上培养，利于观察菌丝生长情况，又便于检查有无杂菌生长。

（3）用途　斜面培养基主要用于一级菌种的分离、培养、提纯和保藏菌种等。

此外，也可用培养皿或三角瓶做容器，制成玻璃平板培养基，主要用于菌种的分离、培养和提纯等。

2.一级菌种培养基常用原料

在配制一级菌种培养基时，选用的原材料要具备以下两个条件：一是要能满足食用菌的营养需要；二是所用原材料来源广，成本低。

（1）马铃薯　又称土豆，富含多种营养物质。一般含有20%的淀粉，2%～3%的蛋白质，0.2%的脂肪，含有多种无机盐、维生素及活性物质。其煮汁是配制母种培养基的常用原料。

（2）葡萄糖　是已被吸收利用的一种单糖，是培养基中最常用的碳源。呈白色或无色结晶粉末，甜度约为蔗糖的70%，易溶于水。

（3）蔗糖　即食糖，可替代葡萄糖作为培养基的碳源。蔗糖经分解后。可成为菌丝易于吸收的单糖——葡萄糖和果糖。蔗糖纯品为白色晶体，有甜味，易溶于水。市售的白糖、砂糖、红糖都是蔗糖。配制母种培养基应选择白糖，以保持培养基为浅色，易于观察。

（4）磷酸二氢钾　白色细粒状晶体，含有磷、钾元素。磷是核酸组成和能量代谢中的重要成分，缺磷，碳和氮就不能很好地被菌丝利用。钾在菌丝细胞组成、营养物质吸收和呼吸代谢中都十分重要。磷酸二氢钾还是一种缓冲剂，使培养基酸碱度保持稳定。亦可用磷酸氢二钾代替。

（5）硫酸镁　为颗粒状晶体或粉末，无色或白色，有苦咸味，溶于水。主要供给镁元素和硫元素。镁能延缓菌丝体的衰老，促进酶系的活化，加速各种酶对纤维素、半纤维素和木质素等大分子物质的降解。

（6）蛋白胨　简称胨，是蛋白质经酸、碱或蛋白酶不完全水解的产物。其组成和结构较蛋白质简单，比氨基酸复杂，可溶于水，是配制母种培养基常用的氮源。

（7）酵母膏　是啤酒酵母或面包酵母的浸汁经低温干燥而成。富含氨基酸、维生素。

（8）琼脂　又称洋菜。是一级菌种培养基常用的凝固剂，由红藻中的石花菜提取出来的半乳糖、杂多糖的硫酸酯。其特点是性能稳定，不能被一般微生物分解，仅仅起凝固作用。大约96℃熔化为溶胶，40℃以下时又重新凝固成透明的胨胶，而且反复熔化、凝固不会改变其性能。一般培养基的琼脂用量为2%。但根据使用的目的和季节变化以及琼脂质量的不同，用量在1.5%～2%之间。夏季气温高，蒸发量大，琼脂用量可适当多些，冬季可适当减少用量。